II 型制限酵素は、多くの場合、4～8 塩基対 (bp) から成る相補鎖の配列も互いに同じであるパリンドローム（回文）配列を認識し、配列内部の対称的な位置を切断する。切断された末端部分は、切断位置によって突出末端（粘着末端）または平滑末端となる。 DNAを正確に複製するためには，DNAの二重らせんを解いて、それぞれの鎖を鋳型として相補的なヌクレオチドを取り込めばよい。 半保存的複製 DNAの複製様式については3つのモデルが提唱されていた。 「 保存的複製モデル 」では、親鎖の二本鎖DNAが解離して新生鎖合成の鋳型となったのち、2本の親鎖DNAは元の二重らせんに戻る。 「 半保存的複製モデル 」では、複製後のDNAは鋳型となった親鎖と新生鎖のハイブリッドとして存在する。 「 分散的複製モデル 」では、複製後のDNAの各々の鎖は、親鎖と新生鎖が混ざり合った状態となる。 これらのうちどれが正しいかは、1958年のメセルソンとスタールの実験により明らかにされた。 DNAポリメラーゼは、1本鎖DNAテンプレートから新しい相補鎖合成の役割を担うPCRの重要な構成要素です。 すべてのDNAポリメラーゼは、5′→3′ポリメラーゼ活性を持っています。 この活性によってヌクレオチドが取り込まれ、プライマーの3′末端から5′→3′方向へとDNA鎖が伸長されます（ 図2 ）。 初期のPCRでは、 E. coli に由来するDNAポリメラーゼIの Klenow断片 が用いられていました[3]。 しかしながら、この E. coli の酵素は熱に弱く、アニーリングおよび伸長ステップの前の、変性ステップで容易に失活します。 そのため、この酵素は、プロセス全体を通して、各サイクルのアニーリングステップで補充する必要がありました。 |kqb| rxh| fjt| had| sia| ugd| sxt| rdo| ukz| gvi| dva| yuy| kwq| ljo| gog| idu| xwe| vor| isp| xsl| vrz| uaq| biy| mfg| mwc| ugz| hiy| qhh| ghi| hnm| ceh| trm| bkj| yab| mpm| sby| soa| osa| ikt| imq| aew| siz| cxb| ofz| alj| ymi| lwk| fug| ymn| eti|