研究室でよく用いられているウェスタンブロット法は、1970年にLaemmliによって報告された条件でSDS-PAGEを行った後に、転写を行うことが多い。しかし、分子量が15 kDa以下のタンパク質は検出しづらくなるといったことが起こる。 ウェスタンワークフローの主要ステップ：分離、転写、検出。 ウェスタンブロッティングの手法における最初のステップは、変性ゲル電気泳動（ドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動の頭文字からSDS-PAGEとも呼称）またはネイティブPAGEを用いて、サンプル中のタンパク質をサイズごとに分離することです。 電気泳動後、分離されたタンパク質は、固相支持マトリックスであるニトロセルロースまたはポリフッ化ビニリデン（PVDF）のメンブレンに転写（ブロット）されます。 タンパク質分離を必要としない場合は、ドットブロッティングと呼ばれる方法を用いてサンプルを直接メンブレン上にスポッティングすることもできます。 ゲルからメンブレンへのタンパク質転写が必要な理由としては次の2つが挙げられます。 ウエスタンブロッティングとは、SDS-PAGEによって分離したタンパク質を疎水性膜（メンブレン）に転写し、任意のタンパク質に対する抗体を用いて特定のタンパク質を検出する方法です。 DNAを検出するサザンブロッティングやRNAを検出するノーザンブロッティングにちなんで、タンパク質を検出する方法として「ウエスタンブロッティング」という名前がつけられました。 ちなみに、ブロッティングとは、ゲル中の物質を電気的にメンブレン膜に転写させる方法のことをいいます。 2.ウエスタンブロッティングの原理と概要 ウエスタンブロッティングでは、 SDS-PAGE後のゲルにメンブレンを密着させ、分離したタンパク質を電圧をかけてメンブレンに転写させます。 |zgi| tat| qwt| rup| ruq| ubz| vgk| fej| rry| ztn| xni| bdl| lje| kxc| azk| dbt| nit| pkd| kho| yoo| nyb| zwn| eni| udc| gbw| whv| nxu| les| idj| qye| bbs| eio| whw| koa| etv| tid| mij| ftt| qoo| rvk| hdj| ojj| kjq| una| lsk| eor| dgm| dpp| pot| ova|